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      豬細(xì)小病毒檢測試劑盒說明書

      產(chǎn)品型號:

      廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家

      訪問量:1313

      更新時間:2024-07-10

      簡要描述:

      豬細(xì)小病毒檢測試劑盒說明書原理

      本試劑盒針對豬細(xì)小病毒的高度保守區(qū)域設(shè)計(jì)特異性引物和探針,在反應(yīng)體系中含豬細(xì)小病毒基因組模板的情況下,PCR反應(yīng)得以進(jìn)行并釋放熒光信號。利用熒光定量PCR儀對PCR過程中相應(yīng)通道信號進(jìn)行實(shí)時監(jiān)測和輸出,實(shí)現(xiàn)檢測結(jié)果的定性分析。

      詳細(xì)說明:

      豬細(xì)小病毒抗體檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法)

      使用說明書


      產(chǎn)品名稱

      通用名:豬細(xì)小病毒抗體檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法)


      包裝規(guī)格

      96T×1/


      檢測原理

         本試劑盒由預(yù)包被豬細(xì)小病毒重組蛋白的酶標(biāo)板、酶標(biāo)記物及其他配套試劑組成,應(yīng)用酶聯(lián)免疫法(ELISA)原理檢測豬血清、血漿樣本中豬細(xì)小病毒抗體。實(shí)驗(yàn)時在酶標(biāo)板中加入對照血清和待檢樣本,經(jīng)溫育后若樣品中含有豬細(xì)小病毒抗體,則將與酶標(biāo)板上抗原結(jié)合,經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的其他成分后;再加入酶標(biāo)記物,與酶標(biāo)板上抗原抗體復(fù)合物發(fā)生特異性結(jié)合;再經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的酶標(biāo)記物,在孔中加TMB底物液,與酶標(biāo)結(jié)合物反應(yīng)形成藍(lán)色產(chǎn)物,顯色深淺與樣品中的特異性抗體含量成正相關(guān);加入終止液終止反應(yīng)后,產(chǎn)物變?yōu)辄S色;用酶標(biāo)儀在450nm波長測定各反應(yīng)孔中的吸光值,即可知樣品是否含有豬細(xì)小病毒抗體。


      試劑盒組成

      序號

      名稱

      規(guī)格/96T×1

      1

      酶標(biāo)記物

      12ml×1(紅蓋)

      2

      樣品稀釋液

      22ml×1(黃蓋)

      3

      20X濃縮洗滌液

      40ml×1(藍(lán)蓋)

      4

      底物液A

      6ml×1(白蓋)

      5

      底物液B

      6ml×1(黑蓋)

      6

      終止液

      12ml×1(黃蓋)

      7

      陽性對照

      1.0 ml×1(紅蓋)

      8

      陰性對照

      1.0 ml×1(綠蓋)

      9

      酶標(biāo)板

      96T×1

      10

      封板膜

      1

      11

      說明書

      1


      儲存及有效期

      28℃保存,有效期12個月。

      包被板開封后請于28℃避光保存,避免受潮。使用期限為2個月。


      適用儀器

      450nm波長的酶標(biāo)儀,37℃恒溫設(shè)備,可調(diào)微量移液器。


      樣品準(zhǔn)備

      1.取動物全血按常規(guī)方法制備血清,要求血清清亮,無溶血、無污染。樣品1周內(nèi)可于28℃保存,長期需置-20℃保存。

      2.根據(jù)樣本數(shù)量準(zhǔn)備對應(yīng)數(shù)量的小刻度EP管或血清稀釋盤,用樣品稀釋液將待檢血清按50倍稀釋(如4μl血清加入196μl樣品稀釋液中,混勻)陰性、陽性對照不用稀釋。

      3.濃縮洗滌液使用前應(yīng)恢復(fù)至室溫使沉淀溶解,然后用蒸餾水或去離子水作20倍稀釋成工作洗滌液(19份蒸餾水或去離子水加1份濃縮洗滌液)


      檢驗(yàn)方法

      1.使用前將試劑盒置室溫30分鐘,恢復(fù)至室溫。

      2.取所需用量酶標(biāo)板條,設(shè)陰性、陽性對照各1孔,未用的板條盡快密封,28℃保存。

      3.陰性、陽性對照孔分別加入陰性、陽性對照100μl;樣品孔每孔加入稀釋后的樣品100μl

      4.混勻,蓋好蓋板膜,置37℃溫箱孵育30分鐘。

      5.甩去孔內(nèi)液體,每孔加250ul工作洗滌液,用震蕩混勻的方式洗滌60秒后棄去,重復(fù)洗滌5次,每次洗滌后需拍干液體。

      6.每孔加酶標(biāo)記物100μl,置37℃避光反應(yīng)30分鐘。

      7.甩去孔內(nèi)液體,每孔加250ul工作洗滌液,用震蕩混勻的方式洗滌60秒后棄去,重復(fù)洗滌5次,每次洗滌后需拍干液體。

      8.根據(jù)樣本數(shù)量將顯色液A與顯色液B按等體積比例混勻配置為底物工作液,現(xiàn)配現(xiàn)用。每孔加100ul,置37℃避光反應(yīng)10分鐘。

      9.每孔加終止液100μl,混勻,于450nm 測定各孔吸光值(OD值),


      參考值

      實(shí)驗(yàn)正常的情況下,陽性對照OD-陰性對照OD0.2


      檢驗(yàn)結(jié)果的解釋

      1. S/P(樣本OD-陰性對照OD)/(陽性對照OD-陰性對照OD)

      2. S/P0.4時結(jié)果判讀為陽性。

      3. 0.2S/P0.4時結(jié)果為疑似陽性;若接種過對應(yīng)疫苗,則提示抗體水平不足,建議補(bǔ)打疫苗。

      4. S/P0.2時結(jié)果判讀為陰性。


      試驗(yàn)方法的局限性

      1. 本試劑盒僅作為定性檢測豬血清、血漿中豬細(xì)小病毒抗體的粗略評估。

      2. 本試劑盒僅供研究使用,不得用于臨床實(shí)驗(yàn)或人體實(shí)驗(yàn)。


      注意事項(xiàng)

      1.實(shí)驗(yàn)操作時需戴手套、穿工作衣,嚴(yán)格健全和執(zhí)行消毒隔離制度,各種實(shí)驗(yàn)廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。

      2.終止液具有腐蝕性,應(yīng)避免接觸皮膚和衣物,如不慎接觸請立即用大量自來水沖洗。

      3.酶標(biāo)板從冷藏環(huán)境中取出時應(yīng)恢復(fù)至室溫方可開袋,未用完的酶標(biāo)板需放入有干燥劑的密封袋中保存。

      4.濃縮洗滌液在低溫時容易結(jié)晶,使用時需恢復(fù)至室溫以*溶解。

      5.洗滌時各孔均需加滿液體,防止孔口有游離酶不能洗凈。

      6.用于檢測的樣品應(yīng)保持新鮮。

      7.試驗(yàn)結(jié)果的判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)。

      8.不同批號試劑組分不得混用。


      生產(chǎn)企業(yè)

      企業(yè)名稱:賽諾利康生物技術(shù)(北京)有限公司

      地    址:北京市昌平區(qū)科技園超前路甲111號樓7





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